Characterization of an Egyptian Spodoptera Littoralis Nucleopolyhedrovirus with Cloning And Sequence of a Highly Conserved Region from Polyhedrin Gene
1Cairo University, Faculty Of Science, Department Of Entomology, Giza,Egypt
J Clin Pract Res 2007; 29(5): 353-362
Full Text PDF

Abstract

Purpose: An Egyptian isolate of Spodoptera littoralis nucleopolyhedrovirus (SpliNPV) was tested for its potential as biocontrol agent in comparison to Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV)
Material And Materials and Methods: Comparative assays of SpliNPV and AcMNPV against 2nd instar larvae of Spodoptera littoralis revealed 4-fold greater susceptibility of S. littoralis to AcMNPV than to SpliNPV based on LC50 values for the two viruses. The LT50s determined for SpliNPV and AcMNPV using LC50 of the virus against 2nd instar larvae were 4.2 and 5.8 days, respectively. A DNA segment of 405 bp containing highly conserved region from polyhedrin gene of SpliNPV(Polh-cr) was succesfully amplified by PCR. Subsequently, this DNA segment was cloned and sequenced. Nucleotide sequence and its deduced amino acid sequence were compared to all available sequences in Genbank.
Results: Sequence alignment results revealed that Polh-cr showed significant similarities with 91 different baculovirus isolates. The percentage of homology ranged from 78 % for Plusia orichalcea NPV to 99 % for SpliNPV.
Conclusion: This highly conserved region provides a candidate that could be used in easy, fast and economic prospective systems for virus detection as well as in biological control strategies.


Polihedrin Gende İyi Korunmuş Bölgenin Klonlanması Ve Zincirlenmesi İle Bir Mısır Spodoptera Littoralis Nukleopolihedrovirüs'ün Karakteristiği
1Kahire Üniversitesi,Bilim Fakültesi, Entomoloji Anabilim Dalı,Giza,Mısır
Journal of Clinical Practice and Research 2007; 5(29): 353-362

Amaç: Bir Mısır Spodoptera littoralis Nucleopolyhedrovirus (SpliNPV) potansiyel biokontrol ajanı olabilmesi için Autographa californica (AcMNPV) ile karşılaştırılarak test edildi.
Gereç ve Yöntemler: Spodoptera littoralis ikinci dönem lavrasına karşı SpliNPV ve AcMNPV virüsünün LC50 değerine dayanan karşılaştırmalı değerlendirmede AcMNPV'nin SpliNPV göre dört kat daha büyük duyarlılık gösterdiği ortaya çıkarılmıştır. Spodoptera littoralis ikinci dönem lavrasına karşı SpliNPV ve AcMNPV virüsünün yaklaşık LC50 değeri kullanılarak belirlenen LT50 sırasıyla 4.2 ve 5.8 gündür. PCR, SpliNPV nın polyhedrin genin iyi korunmuş bölgesini başarıyla amlifiye etti.
405 bp lık bir DNA geni(Polh-cr) elde edildi. Bundan sonra bu DNA segmenti klonlandı ve zincirlendi. Nükleotid dizilimi ve amino asit dizilimi Genbank ta bütün olabilen dizilimlerle karşılaştırıldı.
Bulgular: Polh-cr den üretilen önemli dizilim sonuçları 91 Baculovirus izolatlar ile ilişkilendirildi. Homoloji oranları Plusia orichalcea NPV için % 78 ve SpliNPV için % 99 olarak bulundu.
Sonuç: Biyolojik kontrol stratejilerinde virüs belirlemek için bu yüksek olarak korunmuş bölgenin kullanılması muhtemel kolay, hızlı ve ekonomik olarak görülüyor.